In vivo and In vitro study of Tabernaemontana divaricata and Nerium Oleander using C26 cell lines

Abstract

Introduction: Colorectal cancer (CRC) is the third most common cancer worldwide in men and women, the second largest cause of death related to cancer and the main cause of death in gastrointestinal cancer. The risk of developing this cancer is related to bad alimentary habits, smoking, intestinal inflammatory disease, polyps and genetic factors. The aim of the study was evaluation of Tabernaemontana divaricate and nerium oleander extracts on C26 murine cell lines in vitro for the discovary of new drug for cancer by induction of C26 to balb/c in vivo.Methods: In vitro measurement was done using 2D culture in order to measure the cytotoxicity of Tabernaemontana divaricate and nerium oleander extracts and 3D model was applied to know which plant extract has a high penetration power. MTT assay was used to measure viability of the cells. Then in vivo study was done by using 2 plant extract to know their effect before being used in treatment of tumor that appeared after induction with C26. Finally, histopathological study was applied. Results and conclusion:Thein vitro resultsin 2D culture gives a promising results ofIC50 with Tabernamontana divaricata which is 33μg/ml , while in Nerium Oleander it was 65μg/ml where this indicates that tabernamontana divaricata has a higher effective potency than Nerium oleander. While in 3D model, tabnernamontana divaraciata shows a high penetration power on the cells than Nerium Oleander. However, in vivo different doses of Tabernaemontana divaricata and Nerium Oleander was given oral to albino CD1 mice and observed for 14 days where it founds to be savedand indicates that both plant extracts are giving a promise results. The C26 was then injected to balb/c where after 7days the tumor started to appear and a samples were taken from the colon tumor cells in the subcutaneous tissue of mice in the dorsal side and histpathological study was done. In addition, the 2 plant extract was

14

injected after tumor appearance in order to treat colon cancer tumor. After 24 hours of plant extracts injection the mice died which indicates that they didn’t give a promising results in in vivo. يعد سرطان القولون ثالث أكثر أنواع السرطان شيو ًعا بين الرجال والنساء على مستوى العالم ، وهو ثاني أكبر سبب للوفاة بسبب السرطان والسبب الرئيسي للوفاة في سرطان الجهاز الهضمي. يرتبط خطر اإلصابة بهذا السرطان بالعادات الغذائية السيئة والتدخين ومرض االلتهابات المعوية واألورام الحميدة والعوامل الوراثية.كان الهدف من هذه الدراسة هو تقييم مستخلصات divaricata Tabernaemontana و oleander Nerium على خاليا الفئران C26 داخل المختبر من أجل اكتشاف عقار جديد لعالج السرطان عن طريق تحريض C26 إلى c / balb في الجسم الحي. تم إجراء اختبار في المختبر باستخدام ثقافة ثنائية األبعاد لقياس السمية الخلوية لمستخلصات نباتين ، ثم تم تطبيق نموذج ثالثي األبعاد لمعرفة أي مستخلصات نباتية تتمتع بقوة اختراق عالية.تم استخدام فحص MTT لقياس قابليه الحياة والنمو للخاليا.لقد تم إجراء دراسةتجربه في الجسم الحي باستخدام مستخلصين من النبات لمعرفة تأثيرها وتم حقن خاليا C26 للسماح للورم بالظهور ثم تم عالج الفئران بواسطة المستخلصات النشطة.وأخيرا ، تم تطبيق دراسة نسيجية. النتائج في المختبر في ثقافة ثنائية األبعاد تعطي نسبة واعدة في IC50 مع divaricata Tabernamontana بنسبة 33 ميكروغرام / مل ، بينما في Nerium Oleander ،كانت 65 ميكروغرام / مل مما يدل على أن divaricata tabernicontana تتمتع بفعالية أعلى فعالية من .oleander Neriumأثناء وجوده في نموذج ثالثي األبعاد ، يُظهر divaraciata tabnernamontana قدرة اختراق عالية على الخاليا مقارنةً .Oleander Nerium ومع ذلك ، في دراسه تجربه الجسم الحي أعطيت جرعات مختلفة من بـ divaricata Tabernaemontanaو Oleander Nerium عن طريق الفم لفئران albino CD1 وتم رصدها لمدة 14 يو ًما حيث وجدت أن الفئران بقيت حية دون أي تأثير عليها مما يشير إلى أن المستخلصات النباتية تعطي نتائج واعدة . تم حقن C26الي c/balb حيث بدا الورم في الظهور بعد اسبوع وتم أخذ عينات من خاليا ورم القولون في األنسجة تحت الجلد من الفئران في الجانب الظهري وتم إجراء دراسة نسيجية. باإلضافة إلى ذلك ، تم حقن المستخلصات النباتية بعد ظهور الورم من أجل عالج ورم سرطان القولون. بعد 24 ساعة من حقن المستخلصات النباتية ، ماتت الفئران مما يدل على أنها لم تعطي نتائج واعدة في تجربة الجسم الحي